正如学姊们所料，前面的中量清水，充其量只是让她们的肠道先适应而已，毕竟她们的肠道虽然曾经历过每天固定的浣肠清洁，但是近来她们的肠道蠕动能力下滑，不再每天浣肠排出来的都是带有颜色或臭味的秽水一段时间后，她们也终于获允只有在肠道末段变得肮脏时再进行灌肠清洁即可，依照她们个人而异，甚至还有超过一周都不用灌肠清洁的学姊（然而使用「菊穴清洁剂」提高菊穴敏感度的肠道清洁仍要每天进行，只有灌肠可以省略而已），如果猛然用较剧烈的灌肠液或灌肠量，很可能导致她们的肠道承受不了。
而经过三次的中量清水浣肠后，学姊们也开始了「真正」的浣肠。
她们被安排的浣肠顺序，其实并不是助教单纯想用多次的浣肠来凌虐、玩弄这些可怜的女孩们，而是有其意义的。
最初的三次中量清水浣肠，除了是让她们的肠道先适应浣肠之外，也是先对肠道进行初步的清洁；接着的中量甘油，因能刺激肠道蠕动，能够更进一步让较深处的污物在甘油的润滑下，被带到肠道末段进而排出，而后面的三轮高量的清水，当然就是为了洗掉肠道残存的甘油以及被甘油带出来的，原本积累在肠道深处未成形的软粪或其他残渣。
接着的气泡水，可以藉由气泡爆破的威力，将残黏在肠壁皱褶处的污物去除之外，也会稍微地将小量的肠壁黏膜剥离，将肠壁黏膜内的细胞组织曝露出来，才能让真菌成功扎根深入。
灌入培养液前的最后一步骤，是用低量的杀菌液，对肠内负责防御外来菌入侵的大肠菌进行轻微的杀菌，才能让要植入的真菌不会受到大肠杆菌等肠道共生菌影响而无法顺利生长或繁殖，但是因为那些共生菌实际上在肠道免疫上扮演着重要角色，如果太大幅度的破坏肠道的免疫功能，容易影响到女奴的健康，所以前面的多次浣肠，也是要彻底清洁肠道深处，使学姊们的肠道末段「裸露」的部位，在之后的数日不会被新产生、推送到肛门处的粪便污染、致病，就连杀菌液之后没再用可能含有其他病菌的清水灌洗，而是直接灌入事前经过杀菌处理及无菌培养环境下繁殖的真菌培养液，同样也是基于这原因。杀菌液是利用破坏细菌的胞壁消灭大肠菌，而真菌的胞壁结构成分与细菌不同不会受到影响，相对的，残存的杀菌液也能替培养液进行轻微的杀菌辅助，多少也能抑制可能溜进培养液中生长的外来病菌。
饶是如此多重的防范工程，但是经过这一步菊穴改造后的学姊们，免疫力下降或身体变得虚弱都是无可避免的，在之后数周时间，她们的身体健康状况会备受照顾，但也仅止于最低限度地让她们不要生重病而已，并不表示学业可以因此怠惰，更不表示学姊们可以藉由生病的可能而逃避二年级苛重的课业压力。
所以，对她们而言，此刻的菊穴清洁，就算要承受多少痛苦，她们也必须做得彻底，否则她们不仅会在往后数日过得更辛苦，如果留下「健康不佳」的纪录更是会冲击到顾客对她们的购买意愿……
……
经过三轮的中量清水浣肠后，梦梦学姊与思思学姊各自用注射筒汲取了属于自己的中量甘油量，然后跟以往一样交给对方帮忙把那些此时还透明无色的甘油灌入对方的肠道内。
拥有刺激肠道蠕动的甘油进入直肠，马上就带来翻涌的便意，就像是吃坏肚子即将腹泻般强袭着学姊们肛门周围的神经，几乎憋不住即将拉肚子的剧烈绞痛感，让她们愿意放弃矜持直接将肠子里的污物直接排泄出来……
这一切，却因为肛栓的原因而无法如愿……
于是，满腹的绞痛便意，却又无法解放的郁闷，让学姊们饱受着来自身体本能讯号不停抗议的残酷摧残。每一下反射性试图放松肛门让肠道内的液体排出，却又被肛栓堵住造成的回冲，以及自行放松肛门括约肌腾出空隙，却被肛栓外围的软橡胶更加进一步扩张，彷佛要被撑裂般的痛楚，让她们的浣肠地狱不仅无法适应或舒缓，反而还一次次地变本加厉般疼痛。
思思学姊与梦梦学姊两人，原本还试图藉由与对方聊天转移注意力，但是肠子内的绞痛越来越剧烈，甚至她们已经分不清楚自己聊天时的肛门是在「憋住便意」还是一直想「排泄便意」，完全不受控的肠道，反而像是不停提醒她们此时一边跟好友聊天却一边大便的倒错感，使她们在这种疼痛与羞耻之余也无法保持理智地聊天，到得后来，她们也只能勉强地伸出手与对方紧紧牵住，一起捱过这痛苦又羞耻的甘油浣肠。
终于获准可以排泄后，两个女孩争先恐后地以标准的姿态蹲在自己的水桶前，排出体内的浣肠液。但这次不再像之前那样排出了近乎清澈的清水了。因为甘油刺激肠道剧烈蠕动了数分钟，早已把肠道较深处的，甚至都还未完全消化的食物或软粪，全都被肠道的蠕动推挤到肛门口，再混合着甘油一起排泄出来。
对于很久没有真正「排粪」的学姊们，晨洗时只要检查到稍有粪渣滞留在肛门附近的肠道，就会施以多次且大量的清水灌洗，排出来的水虽然带有些残余的软粪，但因为原本量就不多，加上清水的大量稀释后，直接排泄到便器内也不会有太多的臭味。
如今可就不同了，每个女孩经过甘油彻底浣肠，洗出了原本在肠道深处的，因为肠道蠕动功能减弱而不知滞留多久的粪渣，一起被排了出来，而甘油受限于「安全」考虑，无法灌入如清水般的分量，又没办法洗涤粪便原本的恶臭味，而且在这密闭的实验室房间内，是四、五十位女孩们同时浣肠，也是在几乎相同的时间获准排泄后，将肚子内的甘油排出体外。
梦梦学姊与思思学姊两人再次获准排泄时，因为比刚才三次用清水浣肠更加强烈的便意及肚子绞痛，在感觉肛栓一松，更是不敢拖延地马上直立起身子后，采取标准姿势，甚至多次排泻而出无色无臭的清水使她们早已不觉得自己是在「大便」，快要忘记如厕的羞耻，也让她们忽略了要去回避彼此的视线，只想着赶紧蹲在水桶上把体内的甘油浣肠液排出，直到发觉眼前好友所排放的，竟是带有不少固态物体的，颜色土黄污浊的液体，同时自己也感觉到从肛门排放出来的东西与以往单纯的清水有不同的感觉，以及像是拉肚子时会有的熟悉的解放感，再加上四处飘散而来的臭味，才惊觉自己此刻是真的在「拉屎」，而且是当着好友的面……
两个女孩都意识到了这一点，而且从她们看到对方的表情反应，也确认了对方也发现自己意识到这一点了，原本能相安无事在对方面前排泄出浣肠后满腹清水的她们，此时都羞红着脸急忙转过头去，但饶是如此，经过严格教育训练的她们，却不敢因为羞耻而稍微合拢双腿或是用其他方式遮羞，只能闭紧双眼，并努力说服自己那些飘散过来的臭味不是自己的，藉此来逃避现实而已。
确实，这一轮的多数学姊们所排泄出来的都是「有料」的，仅有少数学姊可能是最近有进行比较彻底的浣肠清洁等原因，才能在这次的甘油浣肠后仍抱着那桶装着没什么颜色浣肠液的水桶，不像其他学姊们抱着自己排泄出来的带有不少软粪的浣肠液接受助教检查时，都觉得是要被检查自己粪便的剧烈羞耻感。
这一轮的甘油浣肠后，又要再次用清水彻底清洁肠道，不过这次是高量的清水了。看着注射筒里面那远比前几次浣肠都还要高出一大截的水量，梦梦学姊恐惧地皱着眉头，她曾经体验过几次这种高量清水浣肠的折磨，也清楚接下来需要面对多么恐怖的痛楚。
事实上也正如梦梦学姊的想象，高量的清水同样带给她们每个女孩难以忍受的便意，但是跟刚才甘油所带来的肠胃搅动的绞痛不同，这次过多的清水浣肠所带来的，是宛如要将她们的肠道涨破般，整条肠子撑胀到极限的可怕痛楚。而且因为肛门被肛栓撑开，条件性反射让她们的肠子无法控制地试图夹起括约肌把那可怕的便意排解出来，却反倒造成更剧烈的胀裂感。
更让她们煎熬的是，她们明明痛得想倒地打滚，但是却得耗费巨大的心力来克制这种痛到想扭动身子的痛苦，跟刚才只用中量浣肠液灌肠的状况完全不同，她们此时的肠道几乎没有太多的挤压空间，只要稍微挪动身子改变姿势，都会让她们的肚子疼上数百倍……
然而，当梦梦学姊与思思学姊如同之前一样，两人同时帮对方浣肠时，都还没注意到她们的疏忽，等到两人都在疼得死去活来之中达到这次浣肠规定时间，需要解放的同时，才惊觉一个残酷的现实，早已虚脱乏力、快要无法动弹的她们，却还得在助教帮她们解除肛栓的禁锢后，以最快的速度爬起身来，以标准姿势蹲在水桶上方，可是强烈的便意使她们根本没得忍，几乎是刚觉得肛门口一松，就感觉到清水正源源不绝地从自己的肛门不受控地流出来，虽然她们很快就忍着剧烈的痛楚爬到水桶上，但是于此同时，她们所在的地板也已经积累了一摊不小的水滩了。
这一滩由她们自己排出的水，当然得由她们自己清理干净，不过经过这次教训，梦梦学姊与思思学姊也很快发现不能这样两人同时浣肠，最后在经过协调之下，决定改由两人轮流帮对方浣肠，被浣肠的人再与便意及肚痛对抗同时，负责帮对方浣肠的人可以从旁协助减轻她的折磨、辅助她排泄，也可以趁此机会休息一会。
再请示过助教后，好不容易也得到了许可，但这种交换并非全无代价的。为了确保实验能顺利进行，每个女孩其实都被要求在时限内完成整个菊穴清洁步骤，否则时间一到，助教们就会将原本集装所有女孩们排泄出来的秽水运走，而女孩们仍得继续进行未完成的浣肠，只不过少了可以倒掉排泄出来的浣肠液的地方，就得「自行处理」，而就助教的说法是，除了杀菌液这类无法饮用的浣肠液之外，其他排泄出来的清水或气泡水等等，最直接的处理方式就是重新装入这些女孩的肚内，只不过这次会改由上面的嘴巴来喝...
幸好到目前为止，梦梦学姊与思思学姊两人的浣肠都算顺利，就连刚才被甘油浣肠后的第一次高量清水清洗肠道，也不像其他几位学姊那样因为被洗出太多秽物而不被计数。但如果要分开浣肠，所需时间势必会加倍，为了避免因为拖延而无法及时完成之后的灌肠，她们也势必得选择压缩每次浣肠的时间，相对的，她们就得灌入比原本还要更多的浣肠液，忍受着更剧烈的痛楚。
于是，当梦梦学姊用注射筒汲取了比刚才更多出一截的水量，交给帮她浣肠的思思学姊时，看着她犹疑的表情，也只能勉强露出苦笑，摆出适合被浣肠的跪趴姿势，微微扭动着屁股示意。
而后，她们迎来了更严苛的浣肠清洁。不用忍受着肠道像是快要炸开的痛楚与虚脱感，让思思学姊可以更专注地将注射筒内的清水全推送至梦梦学姐的肛门内，然而那些水量早已超出一般人所能承受的极限，肠壁的挤迫带来强力的回推水压，使思思学姊还得卯足全力才能把水全部灌入梦梦学姊体内，而梦梦学姊更是早已忍不住痛苦地呻吟起来，带给思思学姊对自己的行为产生的愧疚感。
而等到所有的水都灌进去梦梦学姊的肠道内之后，思思学姊还得使出浑身解数，才能帮梦梦学姊熬过这段肚子像是快要炸裂般的剧烈痛苦。此时的梦梦学姊已经痛到根本无法正常说话，甚至连旁人说的话也都听不进去，全身颤抖直冒冷汗，不停地痛苦哀号着。思思学姊先是在旁边用一只手搂住梦梦学姊帮助她保持姿势别乱动，另一只手伸过去轻抚梦梦学姐的脸颊，替她拭汗并安慰着她；到后来梦梦学姊已经濒临极限快要忍不住的时后，思思学姊更是直接将嘴凑上去亲吻着梦梦学姊那因为痛苦而不停发出哀号声的双唇，替她减轻痛苦与不适……
折腾了好一会，梦梦学姊终于可以将体内的大量清水排出，这时的梦梦学姊已经虚脱到肠子都无法出力了，所以思思学姊不仅要搀扶住梦梦学姊才能让她半蹲在水桶上，侍候她排泄的同时还得用一只手轻轻压迫她的小腹，才能把体内的水排放干净，下一次才能灌入同样大量的清水……
然后，换成还没从虚脱中回复体力的梦梦学姊，得帮思思学姊灌肠，而梦梦学姊原本等待思思学姊浣肠时可以拿来休息之际，也得花费心力陪伴、协助思思学姊熬过高量清水灌肠所带来的痛苦，也没能充分休息……
……
在这样可怕又漫长的灌肠地狱中，她们总算是把她们的菊穴彻底清洗干净，她们的所有力气也像是被洗去了一样，瘫软地躺在地上。已经结束浣肠的她们，经历多次且粗暴灌洗的肠道却还在不受控地流出残存的清水，而且她们的菊穴也已经在刚才被气泡水的气泡不停爆破的痛楚中麻木失去知觉；若不是从肛门口传遍股间的沁凉感，她们都还不知道自己的肛门还兀自流水潺潺。
而且，虽然已经把多数的清水排空，但是她们的肚子仍感觉到胀胀的，那是刚才气泡水灌肠后的结果，虽然气泡水只是用中等的水量，但是里面的气泡不仅对浸润在气泡水的肠壁造成巨大的刺激与痛楚，也把里面的气体送入到学姊们的肠道更深处，直到气泡水排空，她们的肠道仍然被气体胀满着，而这些气体除了给后续的高量清水浣肠带来更加剧烈的胀痛外，也让灌肠结束的她们，从菊穴还时不时传来响亮的放屁声，幸好她们的菊穴已经清洁到放出来的只是没臭味的响屁，否则只会令她们更加感到羞耻与尴尬。
不过，对于梦梦学姊，原本无法思考的她，在这样不停地放屁之下，反倒提醒她早上的灵蛇钻课程，还有那个专属于她被交办的，作为处罚的「作业」……
……
最后的杀菌液浣肠，虽然要执行三次，但是因为只有要消除肛门口及直肠末端部位的原生菌种，所以只需低量的杀菌液，对于肛门麻木的她们，已经没有太大的问题了。
等到第三轮的杀菌液也排泄干净后，学姊们并没有时间休息，就得被赶去另一个小房间，进行真菌培养液的浣肠，将贴有她们名字标签，由她们亲自挑选、经过一周培养的真菌培养液，灌入她们的肠道内。
在她们浣肠清洁肠道时，那些真菌培养液也不是闲置着，而是被助教带到这小房间内，利用微生物实验室内常见的仪器进行类似超音波震荡，将真菌打散均匀溶布在整个培养液中，并在无菌操作台内，把真菌培养液装入医疗用等级的注射针筒内。
已经准备就绪的真菌，学姊们来到这里，就只要抬高屁股，让助教把这些真菌培养液直接灌入她们肠道内，就可以完成了。
如此简单的步骤，对她们的心境却是起了很大的纠结，甚至很多在过去一年就把眼泪流干，如今已经很久没哭过的学姊，在感受到略低于体温的培养液进入自己肠道内时，仍流下了对未来感到绝望的眼泪。未来不管自己的主人喜不喜欢肛交也好，甚至有机会摆脱性奴身分变成一般人的身分也罢，她们也会变成喜欢被肛交胜过正常性交，甚至屁股变得欲求不满、时刻想脱裤子给人肏屁眼的变态了。
不仅如此，就算是原本对肛交还心有抗拒的一些女孩们，接受了这样的菊穴改造手术后，将来也只能祈求未来挑选中自己的主人是肛交爱好者，就算她们的心理还是抗拒甚至厌恶着这种不洁行为，但是她们无法自主的身体也将不可挽回地堕落沉沦了。
梦梦学姊与思思学姊，也一前一后地被灌入她们的真菌培养液，已经被刚才的浣肠清洁弄得麻木了的肠道，似乎还隐约能感受到培养液中的真菌菌丝正缓缓地流动、沾附到肠壁上，而已经虚脱无力的她们，也跟其他女孩们一样，除了默默流泪暗自神伤外，也没有体力或精神多做什么，甚至要她们撑起身子维持姿势等待真菌培养液灌入她们肠道内，就已经很勉强了。
真菌培养液全都灌入学姊们的体内后，她们今天的改造手术也正式告一段落了，堵塞在她们肛门入口的肛栓并没有被拔除，灌入她们体内的灌肠液也没有被允许排出，而是继续保留在她们肠道内，等待肠壁缓慢吸收，也让那些真菌有更充足的时间扎根。
「你们菊穴上的肛栓，直到明天晨洗结束之后，才可以获准拔除。」助教在最后说着：「这一周，直到下周四进行下一步菊穴改造之前，你们体内的真菌聚落还很脆弱，稍一不慎就无法存活，导致今天的菊穴改造手术失败，所以如果不想要让今天经历过的事情全都重来一遍，或是不想尝到更极端的菊穴改造方式，就最好给我铭记以下的话。」
「第一点，这一周之内禁止大便，如果刚刚有好好把体内清洁干净的话，要一个礼拜不大便应该不是什么难事；第二点，这一周不准清洁菊穴，就连菊穴外的菊蕾也要避免沾到水或其他清洁剂；第三点，严禁对菊穴进行各种侵入式行为，不管是手指、玩具，甚至是男人的肉棒，你们这一周菊穴可以不被任何人使用，但你们前面的骚屄或嘴巴都要照常被使用。简而言之，在这一周，你们的菊穴可以好好休息，好好享受你们菊穴还没骚起来的最后时光吧！」
听到这里，学姊们都感到百感交集，她们的肛门早已被不计其数的男人肉棒或是各种东西侵入习惯了，忽然得到一周的休息，反而有一种陌生感。可是在这些学姊里面，却有一位学姊此时却开始不安地蠢蠢欲动。
「没事的话就下课吧！该去接你们的直属了。今天的她们学了作为贱奴很重要的『小豆手淫』，身为前辈的你们，可要好好督促她们复习喔！」
助教说完，正准备放所有学姊们离开实验室，但是梦梦学姊却及时唤住了他。
「对不起……贱奴梦梦……有问题想请教……助教大人们……」梦梦学姊终于鼓足勇气举手发言，其他学姊们原本正要起身离开，也被梦梦学姊的异样而停下脚步，梦梦学姊在众多同学们好奇眼光的环伺下，更显尴尬与困窘，但是一听到助教说这周的菊穴要严禁各种侵入或刺激，想起早上灵蛇钻课程的梦梦学姊，不得不当着所有同学的面请询助教。
「贱奴梦梦…今早修习灵蛇钻课程时……因为成效不佳……教…教官便派遣一项作业……要贱奴梦梦在这一周……向…向所有同学…请教……灵蛇钻……所…所以……」
梦梦学姊不但说得不清楚，话说到一半也已经羞得说不下去。她之前还没告诉其他同学们这件事，还没让全班同学们知道，因为她自己的表现不佳，所有同学都要成为她的课后练习对象……
原本还在思考要如何一一私下向所有同学提出这种羞耻的请求，但是听到肛门要禁用一周，这也意味着她根本无法完成这项作业，迫不得已之下，她也只能在这不恰当的场合下向助教们求助。
果不其然，虽然有不少学姊还没会意过来，但是助教倒是很快就理解梦梦学姊的意思，除此之外也有几个学姊也搞懂了「向她们请教灵蛇钻」的意思，也开始躁动起来。
「灵蛇钻吗？看不出来你长得这么清秀可爱，骨子里却是这么变态，还去学这种连妓女都不愿意做的性服务课程啊？」助教先是挖苦了梦梦学姊一番，但犹嫌不够的他，接着还直接对着全班女孩们说着：「贱奴们，你们的同学，贱奴梦梦，因为上课学习不专心，被教官派下作业，要一一拿你们当灵蛇钻练习对象，可是因为这一周禁止一切菊穴行为，才在这里哭丧着脸求助……」
助教直接赤裸裸地揭露了梦梦学姊自己羞于启齿之事，原本还不得要领的女孩们也全都知道是怎么一回事了。始终低垂着头不敢面对其他同学的梦梦学姊，也能感受到周遭的氛围起了些变化，原本在周围环伺着她的好奇与疑惑眼神，也渐渐转变成带有些许惊诧、烦躁、鄙视，或是无辜受波及而带有点怨怼的目光。
「你们灵蛇钻的课程负责教官是何教官吧？」那个助教羞辱够梦梦学姊之后，才继续说着，「我们去跟她沟通看看能否将作业延期，菊穴改造是校内最重要的大型手术之一，相信她不会反对的。但是毕竟这作业是因为你学习不佳造成的，你可要有受到额外处罚的觉悟。」
梦梦学姊委屈地点头答允，她从不指望能因此逃过这种形同惩处的作业，但是她内心却是满腹苦水，虽然其他同学都没这问题，只有自己被处罚要去舔所有同学的肛门练习，但是要说「学习不佳」已经很冤枉，被突然安排这样的作业她也是千百个不愿意，刚好碰到菊穴改造手术要把作业延期更不是她能决定的。只不过在这所学校，要诉说自己委屈，每个女孩都说不完，而今天早上的实际情况，也只有其他修习这门课的同学跟她自己才会知晓的了。
「好了，没有其他的事的话就下课吧！」助教说完，刚刚还愣在原地的几位女孩们才回过神来，缓缓走出实验室，但是每个女孩们的心情都更加笼罩一层阴霾了。